响尾蛇的天敌有很多，包括蛇雕（鸩）、鹰、鵰、犀鸟和鹫等猛禽，鼬、浣熊、刺猬和狐狸、獴等小型陆地哺乳动物，以及人类。其中，食蛇蛙是响尾蛇的特别天敌。食蛇蛙能够捕食体长在80公分以内的蛇，无论有毒还是无毒，它们的巨大嘴巴和长舌头能够轻松黏住并捕食猎物。响尾蛇的尾巴上有角质环，活动时会发出声音，这成为了它们的致命弱点，容易被天敌发现。