1、将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2毫升；

2、加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，122摄氏度高压灭菌15分钟

3、如用于菌落计数，琼脂量为百分之1、5；

4、如作成平板或斜面，则应为百分之2。

现在有成品营养琼脂培养基，这种药品是厂商配制好的营养琼脂，可以加水后直接制作培养基，不需要自行配制。