手机插入U盘刚开始能用后来不能使用有几种可能的原因：

1. U盘故障：首先，检查U盘是否有损坏或故障。如果U盘本身出现问题，例如芯片损坏、接口松动等，就会导致无法正常识别和使用。

2. 插入不正确：确保U盘正确插入手机的USB接口。有时候，由于不正确插入或插入不稳定，手机无法正确检测到U盘。

3. 文件系统不兼容：手机和U盘之间的文件系统可能不兼容。Android系统通常支持FAT32和exFAT文件系统，如果U盘使用的是其他文件系统，如NTFS，就可能无法识别和使用。

4. 手机权限设置：某些手机系统需要授予U盘读写权限，否则可能无法使用。在手机设置中检查一下是否已经开启了U盘的读写权限。

5. 软件问题：有时候，手机的固件或操作系统出现问题，会导致U盘无法正常使用。尝试重启手机或更新操作系统以解决潜在的软件问题。

如果以上方法都无法解决问题，建议尝试将U盘连接到其他设备上，如电脑，查看是否能够正常工作。如果其他设备也无法识别U盘，很可能是U盘本身出现故障。在这种情况下，可以考虑更换或修复U盘。如果其他设备可以正常使用U盘，可能是手机的问题，建议咨询手机制造商或专业技术支持以获得进一步的帮助和解决方案。